一 使用液氮罐儲(chǔ)存細(xì)胞樣品的具體方法是什么？程序降溫的具體步驟

1.預(yù)先配制凍存液：10 % DMSO + 90%胎牛血清，4℃冰箱保存預(yù)冷；
2.用胰酶對(duì)細(xì)胞進(jìn)行消化：倒去培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基或用槍小心吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基，PBS沖洗兩次，用胰酶消化細(xì)胞（盡可能溫和）；
3.再次用*培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞，將預(yù)冷的凍存液加入消化*的細(xì)胞中，用滴管輕輕吹打混勻。
4.在每支凍存管中加入1ml細(xì)胞液，密封后標(biāo)記凍存細(xì)胞名稱和凍存日期。
5.凍存步驟的細(xì)致直接關(guān)系到細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的活力

細(xì)胞凍存有兩種方法：傳統(tǒng)的方法是利用冷存管處于4℃、 -20℃、 -80℃三溫區(qū)保存，程序降溫方法是利用程序降溫盒設(shè)定程序由室溫降低至-80℃，后再放置到液氮罐中長(zhǎng)期保存。

二 液氮罐與-86度超低溫冰箱保存細(xì)胞的區(qū)別？

首先，凍存的細(xì)胞，溫度越低，保存的時(shí)間越長(zhǎng)，像哺乳類(lèi)細(xì)胞凍-80度，存放于-86度超低溫冰箱內(nèi)，保存半年沒(méi)問(wèn)題，但是如果要保存時(shí)間更長(zhǎng)，或者長(zhǎng)久保存，就必須要用液氮罐來(lái)儲(chǔ)存，-196度超低溫儲(chǔ)存。

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